肾脏在糖代谢过程中有着非常重要的作用，葡萄糖在肾小球滤过，并在肾近曲小管重吸收。钠葡萄糖转运蛋白(SGLTs)属于SLC5葡萄糖转运蛋白家族，SGLTs在肠(SGLT1)和肾(SGLT1和SGLT2)中均有表达。SGLT2主要分布在肾脏近曲小管S1部位，是一种高容量的低亲和性转运体，其主要生理功能是在肾脏近曲小管完成肾滤液中90%葡萄糖的重吸收；相反，SGLT1是高亲和性低容量的转运体，主要分布在肾脏近曲小管的S2/S3部位，将剩余的10%的葡萄糖重吸收。SGLT2促进葡萄糖逆浓度梯度‑主动运输。随后，细胞内葡萄糖由被动扩散离开细胞，通过葡萄糖转运蛋白2 (GLUT2)进入血液(如图1)。

SGLT2抑制剂的发现

1835年，法国科学家在果树的树皮中分离得到根皮苷(Phlorizin，图2)，30年后，有人发现摄入大量根皮苷后会产生尿糖，进一步研究发现，根皮苷会抑制肾小管对葡萄糖的重吸收，并且发现根皮苷对肾脏葡萄糖转运蛋白的亲和力是葡萄糖的1000 – 3000倍，这就是人们研究根皮苷治疗糖尿病的开端。但是根皮苷在体内极易水解成根皮素和葡萄糖，对SGLT1和SGLT2的选择性差，不良反应较大，故而不能广泛应用。但是它带给了人们很好的思路，在根皮苷的基础上，继而开发出更高效稳定的SGLT2抑制剂。

SGLT2抑制剂的发展

目前大多数SGLT2抑制剂仍是在根皮苷基础上发展而来。最初，Tsujihara等人通过研究根皮苷衍生物对增加尿葡萄糖分泌(UGE)的作用，探究其构效关系。根皮苷由A、B、C三个环构成，两个芳香环通过三个碳相连。A环上的4-OH可以被其他基团取代，如一些小的取代基团OMe、H、Me、Et、Cl 、呋喃环、噻吩环等(如下图3所示)。

A环3或4位可以被取代，B环上的4'-OH并非必需基团。与4'-OH相比，B环部分的修饰4'-Me或4'-Et能增加UGE；若将6'-OH改为6'-H或6'-烷氧基，则其活性降低甚至失活；A、B环也可由芳香杂环取代，A，B两环间由1-3个碳相连活性最好，糖环部分OH可以被F、CF3等基团取代；将葡萄糖基团换成半乳糖或木糖等其他糖类取代基，均会改变其活性。B环与C环之间的连接可以为C-O，C-C或C-N连接。氧苷B环上是1'，2'邻位取代，碳苷B环上是1'，3'间位取代。

 

经过大量研究，SGLT2抑制剂的O-葡萄糖苷的药效基团如下图4所示，并且要求O-葡萄糖苷SGLT2抑制剂中心区域为环状的平面结构，在中心区域的末端连接着芳香环及其衍生物。

后来，有人总结了O-葡萄糖苷SGLT2抑制剂的构效关系，如下图5，所示：

                            图5. O-葡萄糖苷SGLT2抑制剂的构效关系

此外，Wyeth发现，带苯环的吡唑啉酮在小鼠(mice)试验中证实有一定的降血糖作用，但在大鼠(rats)身上却没有活性，研究人员进而合成出如下化合物如图6.1，6.2。并证明6.1是潜在的SGLT2抑制剂(22nM SGLT2 EC50)。

鉴于O-苷的化学不稳定等原因，人们又研究了C-苷类SGLT2抑制剂，意外地得到一个稳定并且高效的化合物(如图7)。在此基础上，发现该化合物的极性取代基将降低它的活性。由此，人们进一步开发了一系列化合物，它们的构效关系如图8所示。通过计算化学得出，该类化合物的构象能量较低，所以更稳定。其中，a化合物是潜在的SGLT2抑制剂(EC50=22nM)，亲和性是SGLT2的600倍，同时对GLUT1和GLUT4(葡萄糖转运体)无抑制作用。从取代位置方面讲，间位取代可以增加SGLT1的亲和性；邻位取代将会降低化合物活性，c化合物的活性比b低20倍；d的间位取代不能提高化合物的活性，但还可以接受；对位取代基有很强的活性，非极性取代基像Et 、MeO或者MeS可以使化合物活性增加10-20倍。

                                                     图8. C-苷类SGLT2抑制剂的构效关系

 

上图所示化合物皆为改变末端区的苯环上连接的基团，接着，人们又在中心区域动起手脚，合成另一类化合物，它们的构效关系如图9所示。可喜的是，在体外实验证明该类化合物都有很好活性，其中C4-和C4’-化合物的EC50值均在1-3之间；口服该类化合物，每小时的血糖水平相当于持续5小时未进食的水平。体外实验也证明，C4位取代基最好为Me、Cl、F、OMe、Et、SMe等结构；C4’位的取代基如果比OMe、Et大，将会影响活性；若C4’位的H被F取代，将会增加SGLT1的亲和性，若换成Cl，则对其亲和性降低1000-2000倍；若C4’位的H被OMe或Et取代，则降低化合物的选择性，增加SGLT1的亲和性。

                                                   图9.改变中心区域化合物的构效关系

 

由于e、f、g的表现尤为出色，最终f胜出，由于e和g的易氧化性。f就是我们所说的Dapagliflozin，于2012年11月在欧洲上市，2014年1月被美国FDA批准上市，商品名Farxiga(图10所示)。

目前，已上市的药物除Dapagliflozin仍有以下几种： Canagliflozin、Empagliflozin、Ipragliflozin、Tofogliflozin、Luseogliflozin。

图11.已上市SGLT2抑制剂一览表

 

同样地，Canagliflozin的发现也是将图4的苯环换成其他芳香环(图12)，最终得到图13化合物，并通过临床试验，于2013年3月由美国FDA批准上市。Canagliflozin与双胍类或磺酰脲类联用可以产生较好的效果。总地来说，Canagliflozin有良好的耐受性，通常的不良反应是尿道感染，可以额外使用抗菌药；还会出现渗透性利尿、垂直性低血压、口渴等症状；有极少部分人会出现LDL胆固醇升高现象；关于肾脏的不良反应未见报道。

图12. Canagliflozin构效关系

Empagliflozin由勃林格殷格翰和礼来公司研发，作用效果Dapagliflozin类似，它们同样有着良好的耐受性与类似的不良反应，包括无尿或少尿、脱水、酮酸中毒、尿道感染等。Empagliflozin的结构如图14所示。

Ipragliflozin、Tofogliflozin和Luseogliflozin均由日本PEMA批准上市。其结构如下：

SGLT2抑制剂的优势与发展趋势

作为新型的降血糖药物，SGLT2抑制剂与其他药物相比有明显的优势：(1)它们可以降低餐前和餐后血糖的水平(并不是所有药物能同时降低两者)；(2)由于它们并非刺激胰岛素分泌，所有使用者的低血糖风险比较低；(3)由于其对肾小管的主要作用，产生利尿效果，从而降低了收缩压；(4)有研究发现，SGLT2抑制剂对糖尿病肾病有治疗作用。

 

目前，越来越多的公司加入到SGLT2抑制剂的研发当中，仍有很多药物进行临床试验，非Phlorizin类SGLT2抑制剂也在发展之中，如ISIS-SGLT2Rx，一种反义抑制性microRNA分子；还有公司发展SGLT1和SGLT2双重抑制剂。

 

参考文献：

(1)Case History: Forxiga (Dapagliflozin)，a Potent Selective SGLT2 Inhibitor for Treatment of Diabetes.

(2)SGLT2 inhibitors: a novel choice for the combination therapy in diabetic kidney disease.

(3)Phlorizin: a review

(4)SGLT2 inhibition — a novel strategy for diabetes treatment.

(5)http://www.drugs.com

(6)Discovery of a Potent，Selective Renal Sodium-Dependent Glucose Cotransporter 2 (SGLT2) Inhibitor (HSK0935) for the Treatment of Type 2 Diabetes.

(7)Discovery of Canagliflozin，a Novel C-Glucoside with Thiophene Ring，as Sodium-Dependent Glucose Cotransporter 2 Inhibitor for the Treatment of Type 2Diabetes Mellitus1.

(8)Canaglifl ozin: A Novel SGLT2 Inhibitor for Type 2 Diabetes Mellitus.